Hcy对巨噬细胞胆固醇流出的影响及内质网应激机制的研究
同型半胱氨酸,THP-1单核细胞源性巨噬细胞,动脉粥样硬化
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摘要：目的 探讨同型半胱氨酸 (Homocysteine，Hcy)对巨噬细胞胆固醇流出的影响及内质网应激的作用机制。方法 培养THP-1单核细胞源性巨噬细胞后，分别用不同浓度的Hcy(50、100、200、500 M)处理24h，以未加Hcy的细胞作为对照组，以100 M Hcy+叶酸+维生素B12(VB12) 作为干预组。结果 Hcy可以减少巨噬细胞内胆固醇的流出，与对照组相比有统计学意义(P<0.05)，但并不呈量效关系。干预组与100 M Hcy 组相比TC含量降低，ox-LDL及GRP78、XBP-1、CHOP含量下降，差异有显著性(P<0.05)。结论 Hcy使巨噬细胞内胆固醇的流出受阻，并通过上调ox-LDL含量诱导内质网应激参与了动脉粥样硬化的发生发展。
关键词：同型半胱氨酸；THP-1单核细胞源性巨噬细胞；内质网应激；动脉粥样硬化
动脉粥样硬化(Atherosclerosis， AS)是一类以脂代谢异常和炎症反应为主的复杂性病变，其与脂质沉积、炎性细胞浸润、局部血栓形成及氧自由基产生增多有关。本研究以THP-1单核细胞源性的巨噬细胞为研究对象，用不同浓度的Hcy干预后观察胆固醇流出和ox-LDL的含量，并检测ERS相关蛋白的表达，为进一步揭示Hcy在动脉粥样硬化中的作用提供理论基础。
1 资料与方法
1.1 一般资料 THP-1单核细胞株由本实验室保存；RPMI1640培养基、胎牛血清为Hyclone公司产品；总胆固醇检测试剂盒为北京北化康泰临床试剂有限公司产品；GRP78、CHOP、XBP-1 及ox-LDL检测试剂盒为Groundwork Biotechnology Diagnosticate 公司产品；Hcy、佛波酯(PMA)为Sigma公司产品 ......
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